In vitro трансляция

In vitro трансляция * in vitro трансляцыя * in vitro translation or cell-free t. — метод трансляции изолированной и очищенной иРНК в соответствующий белок in vitro (синтез белка в пробирке). Для этого иРНК смешивается с клеточным экстрактом из E. coli (для прокариотной иРНК) или с лизатом (см.) ретикулоцитов кролика, зародышей пшеницы (для эукариотной иРНК). Такой экстракт практически лишен эндогенной РНК, но в нем есть рибосомные субъединицы (Рибосома), все тРНК, аминоацил-тРНК-синтетазы, белки инициации, транслокации, элонгации, трансляционные факторы, аминокислоты, источники энергии (АТФ, ГТФ и др.). Если в экстракт добавлять радиоактивно меченные аминокислоты, то образующиеся полипептиды будут радиоактивными и легко обнаруживаемыми при электрофорезе (см.) в полиакриламидном геле и при флюорографии. К настоящему времени системы I. v. т. созданы для прокариот (E. coli, Bacillus stearothermophilus) и эукариот (ретикулоциты кролика и др.), а также сформированы сопряженные системы транскрипции и I. v. т., в которых синтезированная мРНК транслируется рибосомами, находящимися в той же бесклеточной системе.